【摘要】目的:探讨ELISA法检测乙肝两对半与FQ-PCR法检测HBV-DNA结果的相关性。方法:乙肝病毒血清标志物检测采用ELISA法, HBV——DNA用FQ-PCR法检测,均按说明书操作。 结果: 大三阳病人,其乙肝DNA阳性率约为82.56%,小三阳达到63.21%.结论: 本检测结果对疾病的发生、发展提供有力依据，同时能够使医生对病情作出进一步解释，并能有效指导治疗,具有一定的应用价值.
【关键词】乙肝两对半；HBV-DNAHepatitis B two fifty-fifty with FQ-PCR union test result relevance discussion
QIN MeiLUGuilan
【Abstract】Objective: Discusses the ELISA law examination hepatitis B two fifty-fifty to examine the HBV-DNA result with the FQ-PCR law the relevance. Method: The hepatitis B virus blood serum designated object examination uses the ELISA law, HBV--DNA examines with the FQ-PCR law, according to instruction booklet operation. Finally: The big three positive patients, its hepatitis B DNA masculine gender rate approximately is 82.56%, small three achieve 63.21%. conclusion positive: This test result to disease"s occurrence, the development provides the powerful basis, simultaneously can cause doctor to make further explanation to the condition, and can instruct the treatment effectively, has certain application value.
【Key words】Hepatitis B two fifty-fifty; HBV-DNA
本文通过对乙肝两对半或PCR结果进行初步探讨、综合分析,对九种HBV血清标志物模式病人血清乙肝DNA的检测结果进行分析，探讨不同组合模式反映乙肝病毒的复制情况.
1材料与方法
1.1标本来源:2007年10月01日~2008年3月31日期间，我院住院及门诊乙肝病例438例, 其中男性282例,女性156例,年龄16~72岁之间,平均年龄为33.5岁。分别以1、2、3、4、5代表HbsAg、HbsAb、HbeAg、HbeAb、HbcAb，示各种模式形式:(1)1、3、5 (2)1、4、5 (3)1、5 (4)1 (5)2、4、5(6)2、5 (7)5 (8)2 (9)1、3、4、5，对这些组合模式病人血清进行乙肝DNA检测。
1.2方法：
1.2.1ELISA法试剂由上海科华实业有限公司提供,使用BIO-RAD Model 680酶标仪比色判断结果，结果判定：样品OD值s/c.o.≥1为阳性，样品OD值s/c.o.＜1为阴性。
1.2.2FQ-PCR法： HBV-DNA试剂盒由中山大学达安基因股份有限公司提供, 操作严格按说明书进行，扩增仪为Roche LightCyclerTM原装进口全自动实时荧光定量PCR扩增仪，反应结束后，由专用自动分析软件计算HBV-DNA定量结果，结果以IU/ml表示。结果判断：≥1000IU/ml为阳性，＜1000IU/ml为阴性。
2结果与讨论
2.1结果如下:
2.2讨论：（1）组病例为临床所称“大三阳”病人,其乙肝DNA阳性率约为95.64%,说明了HBeAg与乙肝之间存在着良好的相关性,表明HBeAg是HBV复制的标志[1],同时也是具有乙肝传染性的标志.但如果HBV基因组发生突变,可致HBV-DNA假阴性.(2)组急性乙肝病毒感染趋于恢复,部分病人病毒复制减弱,传染性减低, 表明HBV复制处于较低水平并可能和宿主DNA发生整合，导致含量较低，通过PCR法证实患者仍有较低水平病毒复制。但另一部分由于出现前C区变异，使得HBeAg无法检测出来,但并不表明病毒复制减弱或传染性降低, 但仍需HBV-DNA作为鉴别病人血液中有无传染性的重要依据,相当一部份“小三阳”存在HBV-DNA阳性,可以作动态监测。(7)组为急性的核心窗口期或曾感染过,有流行病学意义.据文献报道，单抗HBs阳性的献血者21例,PCR检测HBV-DNV均为阴性,说明产生保护性抗体,无传染性[2]。 (8)组结果与文献一致。(3)(4)两组组合为乙肝病毒携带者诊断提供了帮助。(5)组为急性乙肝康复期,开始产生免疫力,既往感染过乙肝病毒。(6)组表示目前仍保持免疫力，但与PCR 符合率较低，对此四组模式是否需进行DNA检测，其实际应用价值有多大，还有待进一步探讨。此外，（9）组结果由于病例数太少，二者结果之间不相符的原因也还有待进一步的探索、研究。
综上所述，由于PCR检测结果能对HBV的感染提供早期诊断，能够清楚的反映病人情况,现已广泛应用于临床, 为疾病的诊断、发生、发展、疗效提供依据，同时帮助临床医生对病情作进一步的解释，有效指导治疗，具有较高的应用价值。而该法与乙肝两对半“大三阳”、“小三阳”较高的符合率，对无条件开展PCR检测的医院，本研究结果有助于临床医师对乙肝患者的病程、疗效作出明确的判断。
参考文献
[1]李影林主编.临床微生物学及检验,第1版北京 人民卫生出版社1986 :528
[2]杨道理等.聚合酶链反应及斑点杂交技术在检测HBV中的应用中华医学检验杂志1993.2:96
作者单位：550000贵州省贵阳市第一人民医院